Abstrakt

Den här rapporten ger en detaljerad teknisk analys av den toxikologiska och genotoxikologiska profilen av pektin-derived acidic oligosaccharides (PAOS), en specifik form av modifierat citruspektin. Analysen baseras på den omfattande säkerhetsutvärderingen av Garthoff et al. iRegulatorisk toxikologi och farmakologi (2010).¹Viktiga fokusområden inkluderar materialets fysikalisk-kemiska karakterisering och renhetsprofil, en kritisk tolkning av det divergerande

in vitrokontra-in vivogenotoxicitetsdata och den mekanistiska förklaringen av en artspecifik -uroteliala hyperplasi som observerats i gnagarmodeller. Data upprättar tillsammans en robust säkerhetsprofil för denna nya prebiotiska ingrediens.

Materialkarakterisering och renhetsprofil

PAOS-preparatet som utvärderades i de pivotala säkerhetsstudierna producerades av pektin av livsmedels-kvalitet via en specifik enzymatisk metod. Processen använder poly(metoxyl- -galakturonid)-lyas (EC 4.2.2.10) och poly(1,4-alfa-D-galakturonid)-glykanhydrolas (EC 3.2.1.15), båda härledda från icke-toxiska-, icke-toxiska organismer.Aspergillus niger.¹Den resulterande produkten är en blandning av linjära oligomerer av galakturonsyra, med nyckelidentitetsspecifikationer inklusive ett galakturonsyrainnehåll på 62 g/100 g, en molekylvikt övervägande under 3800 Da (94 g/100 g) och en metyleringsgrad på 50.¹

För alla material avsett för närings- eller forskningsapplikationer är renhetsprofilen av största vikt. Den sats av PAOS som användes i studierna analyserades noggrant med avseende på föroreningar och rester. Nivåerna avmodifierade tungmetaller av citruspektinoch andra föroreningar visade sig vara exceptionellt låga, i överensstämmelse med principerna för relevant lagstiftning och god jordbrukssed.¹En sammanfattning av dessa resultat presenteras nedan.

Data extraherad från Garthoff et al., 2010¹

De låga nivåerna av mikrogram-per-kilogram för viktiga tungmetaller som kadmium, bly och kvicksilver understryker den rena naturen hos råmaterialet och tillverkningsprocessen.

En kritisk analys av genotoxicitetsdata

Genotoxicitetsbedömningen av PAOS gav resultat som understryker vikten av att beakta den fullständiga toxikologiska bilden, särskilt förhållandet mellanin vitroochin vivodata. PAOS var definitivt inte mutagent i den bakteriella omvända mutationsanalysen (Ames-testet) över fem stammar, med och utan metabolisk aktivering.¹

Men denin vitrodäggdjurscellanalyser gav mer komplexa resultat. Muslymfomanalysen bedömdes som "tvetydig" på grund av positiva svar vid mycket cytotoxiska koncentrationer som inte var reproducerbara och saknade ett tydligt dos-responssamband.¹På liknande sätt, i det kromosomala aberrationstestet med användning av CHO-celler, ansågs PAOS initialt vara klastogent under kontinuerliga behandlingsförhållanden. En uppföljningsundersökning visade att denna effekt var starkt beroende av cytotoxicitet och det använda lösningsmedlet (DMSO). När PAOS suspenderades i odlingsmedium-en mer fysiologiskt relevant vehikel- observerades en signifikant ökning av avvikande celler endast vid den högsta rekommenderade dosen (

5000 ug/ml) och var associerad med hög cytotoxicitet (MI på 34%), vilket fick författarna att dra slutsatsen att det inte var biologiskt relevant.¹Dessa fynd tyder på det positiva

in vitroresultaten var sannolikt artefakter som drivs av cytotoxicitet, en känd störande faktor i sådana analyser.

Den definitiva In Vivo-säkerhetsprofilen

De mest fysiologiskt relevanta uppgifterna för att bedöma genotoxisk risk kommer frånin vivostudier. Ett mikronukleustest integrerades i den 13-veckors subkroniska orala toxicitetsstudien på råttor, en design som säkerställer långvarig exponering för testämnet och dess metaboliter. Studien, som också omfattade eni livmodernexponeringsfasen, visade att PAOS inte påverkade föräldrars hälsa, fertilitet, reproduktion eller valpegenskaper.¹Viktigast av allt är analys av lårbensbenmärgsceller från råttor i hög-dosgruppen (10 % PAOS i kosten, ett intag som överstiger

7 g/kg kroppsvikt/dag) avslöjade ingen ökning av det genomsnittliga antalet mikronukleära polykromatiska erytrocyter jämfört med kontroller.¹Vidare var förhållandet mellan polykromatiska och normokromatiska erytrocyter oförändrat, vilket tyder på ingen cytotoxicitet för benmärgen.¹Detta negativa

in vivoResultatet ger definitiva bevis för att PAOS inte har genotoxisk aktivitet under fysiologiska förhållanden.

Mekanistisk belysning av en art-specifik artefakt

Den sub-kroniska studien avslöjade diffus urotelial hyperplasi hos råttor som fick 10 % PAOS. Snarare än att vara en indikator på direkt toxicitet från oligosackariderna, antogs detta vara en sekundär effekt. En kompletterande mekanistisk studie utformades för att testa hypotesen att hyperplasin orsakades av den samtidiga ökningen av natriumkoncentration och pH i urinen, ett tillstånd som är känt för att inducera denna specifika effekt hos råttor.¹Studien inkluderade en grupp som fick 10 % PAOS plus försurningsmedlet

NH4Cl. Resultaten var otvetydiga: det låga urin-pH i NH4Cl-gruppenhelt förhindrade utvecklingen av urotelial hyperplasi.¹Detta bekräftade mekanismen och visade att effekten inte är inneboende i PAOS utan är en artspecifik artefakt av urinfysiologi, som inte anses vara relevant för människor.¹

Den rigoritet som demonstreras i dessa studier återspeglar det vetenskapliga engagemanget hos ledande tillverkare som Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Som ett nationellt hög-företag som samarbetar med-ledande universitet, prioriterar företaget inte bara tillverkning utan också en djup vetenskaplig förståelse för sina produkter. Deras användning av avancerad enzymatisk hydrolys i en 100 000-grad GMP-certifierad anläggning säkerställer produktionen av en hög renhetmodifierat citruspektinlämpar sig för krävande forsknings- och utvecklingstillämpningar. Kontakta wilson@zjgykp.com om du vill begära tekniska specifikationer, ett analyscertifikat eller diskutera forskningssamarbeten.

Slutsats: En väl-karakteriserad ingrediens för forskning och utveckling

Modifierad citruspektin (PAOS) ​​är ett material med en noggrant undersökt och gynnsam säkerhetsprofil. Den omfattande informationen visar att den inte är-mutagenin vivooch potentiella farhågor frånin vitroanalyser har rationaliserats som artefakter av cytotoxicitet. Observationen av urotelial hyperplasi hos råttor har mekanistiskt förklarats som ett -artsspecifikt svar på förändrad urinkemi och är inte relevant för människor. Materialets höga renhet och extremt låga nivåer av föroreningar, inklusive tungmetaller, gör det till en väl-karakteriserad och pålitlig ingrediens för vidare forskning och utveckling inom näring och farmakologi.

Anförda verk

pektinsäkerhet 1.pdf